Е.Д. Митса, Л.Иу. Кокаева, С.Н. Елански
Оомицете Пхитопхтхора инфестанс (Монт) де Бари изазива касну пламењачу, опасну болест кромпира и парадајза. Један од главних извора примарног инокулума П. инфестанс су дебелозидне репродуктивне одмарајуће структуре – ооспоре.
Хибридне ооспоре, настале као резултат укрштања генетски различитих родитељских сојева, доприносе повећању генотипске разноврсности у популацији, услед чега се убрзава процес адаптације сојева на нове сорте и примењене фунгициде.
Формирање ооспоре П. инфестанс посматрано у теренским условима у многим земљама света: Русији (Смирнов ет ал., 1999), Норвешкој (Хермансен ет ал., 2002), Шведској (Стромберг ет ал., 2001), Холандији (Кессел ет ал., 2002). ) и другим регионима. Ооспоре могу опстати у земљишту у одрживом стању више од 2 године (Бøдкер ет ал., 2006) и изазвати инфекцију биљака након презимљавања (Уланова ет ал., 2010; Лехтинен ет ал., 2002).
Раније је показано да листови биљака различитих слојева грма кромпира имају разлике у отпорности на касну пламењачу; повећава се од доњих листова до горњих. Овај тренд не зависи од старости листа, старости биљке или сорте кромпира (Веспер ет ал., 2003). Истовремено, у литератури нисмо успели да пронађемо податке о разликама у интензитету формирања ооспора у листовима различитих слојева грмља кромпира. Међутим, уколико такве разлике постоје, треба их узети у обзир при одабиру узорака листова за анализу формирања ооспора и при тумачењу резултата других аутора. Сврха овог рада била је проучавање формирања ооспора у одвојеним листовима различитих слојева биљке кромпира смештеним у истим условима влажних комора.
материјали и методе
У раду је коришћено 5 изолата. П. инфестанс различити типови парења изоловани из заражених узорака донетих из региона Москве, Рјазања и Лењинграда. Од ових, одабрана су 3 пара сојева различитих типова парења, који производе обилне ооспоре када су тестирани у медијуму са зобеним агаром.
За тестирање смо користили биљке кромпира без вируса следећих сорти које се узгајају у стакленику (у супстрату тресета): рани Сандрин, Зорачка, Уладар, Озирис, средње рани Иљински, средње сезонски Јанка.
За анализу су одабрани једноставни листови са различитих нивоа биљке кромпира. Три листа су одабрана са доњег нивоа (4 доња сложена листа), три са врха (3-4 сложена листа на врху) и три листа из средине грма. Једноставни листови су измерени, фотографисани на координатном папиру (за израчунавање запремине и површине), а затим стављени доњом страном нагоре на површину стерилне воде сипане у Петријеве посуде од 25 мл. Затим је сваки лист инфициран са једном капи мешане суспензије зооспорангија из изолата типа парења А1 и А2. За три листа узоркована са сваког нивоа, коришћен је инокулум из три различита пара изолата. Један лист је инфициран мешавином инокулума из једног пара изолата.
Да би се припремила суспензија зооспорангија, изолати различитих типова парења су узгајани на агар медијуму овсене каше током 7 дана, након чега су зооспорангије испране стерилном дестилованом водом. Концентрација инокулума је била 5-7 зооспора по видном пољу микроскопа при увећању од 80к. Сваки лист је инфициран једном капи мешане суспензије зооспорангија из изолата типа парења А1 и А2.
У свим експериментима коришћена су 3 листа кромпира по варијанти. После 20 дана инкубације на 18°Ц, сваки лист је хомогенизован у малтеру са 2 мл дестиловане воде. Из добијене суспензије узета су 3 узорка од којих су припремљени препарати за микроскопију.
У свакој варијанти испитано је 180 видних поља, након чега је поново израчунат број ооспора на 1 мм.2 површина листа. Резултати анкете за сваку опцију су усредњени.
Да би се израчунао интервал поверења (μ) за ниво значајности од 0,05, коришћена је следећа формула
где је с стандардна девијација, н је број мерења, т је т-тест константа за ниво значајности од 0,05. Сви прорачуни су обављени у Екцел-у (Мицрософт Оффице пакет).
Резултати и дискусија
Инокулација листова сакупљених са различитих слојева грма кромпира и смештених у истим условима влажних комора открила је разлике у интензитету формирања ооспора. Код свих проучаваних сорти, максимални број ооспора формиран је приликом инокулације листова сакупљених са доњег и средњег слоја грма. Није било значајних разлика у формирању ооспора у доњем и средњем листу.
Минимални број ооспора формиран је у листовима горњег слоја (сл. 1).
У листовима доњег и средњег слоја, максимални број ооспора формиран је у сортама Сандрин, Илиински, Зорацхка, Уладар и Осирис. Нешто мање интензивно су се формирале у листовима сорте Ианка. Максималан број ооспора у листовима горњег слоја забележен је у листовима сорте Уладар, а затим у опадајућем редоследу Зорачка, Озирис, Јанка, Иљински, Сандрин, међутим, нису све разлике биле статистички значајне.
Пиринач. 1. Формирање ооспора у листовима различитих слојева грмља кромпира. Доњи су листови три доња нивоа жбуна, горњи су 3-4 сложена листа са врха биљке, средњи су са средине грма.
Траке грешака означавају интервал поверења на нивоу значајности од 0,05.
На терену формирање ооспора у доњем и средњем лишћу жбуна олакшавају и микроклиматски услови: већа влажност ваздуха, смањена сунчева инсолација и дневне температурне флуктуације (Харрисон, 1992). Приликом прскања одозго, мање пестицида улази у доње и централне делове грма. Да би се смањило формирање ооспора, треба користити технологије које омогућавају да се фунгициди успешно испоруче у доње и средње делове грма. Добри резултати се могу постићи коришћењем прскалица са турбулентним протоком ваздуха и системских фунгицида који се могу проширити на необрађене делове грма.
Овај рад је подржан од стране Руске научне фондације (пројекат бр. 14-50-00029).
Чланак је објављен у часопису „Заштита кромпира“ (бр. 2, 2015.)